Bosch PPS8 C2 Series Manual do Utilizador descarregar pdf (Página 10)

ABBILDUNGSVERZEICHNIS 9

Abbildung 1.1: Hydrolyse eines Triacylglycerins am Beispiel der Spaltung von Trioctanoin mit einer nicht

regiospezifischen Lipase. __________________________________________________15

Abbildung 1.2: Mechanismus der Hydrolyse eines Buttersäureesters. ____________________________17

Abbildung 1.3: Die α/β -Hydrolasefaltung. _________________________________________________18

Abbildung 1.4: Acylwanderung am Beispiel der hydrolytischen Spaltung von Trioctanoin mit der Lipase

aus Rhizopus delemar (RDL)._______________________________________________19

Abbildung 1.5: Veresterung einer Carbonsäure und Alkoholyse. ________________________________20

Abbildung 1.6: Umesterungsreaktionen mit Lipasen. _________________________________________20

Abbildung 1.7: Struktur der Rhizopus oryzae Lipase als Acylenzym mit Trioctanoin als Substrat. ______22

Abbildung 1.8: Einige Beispiele der von Scheib et al. zur Bestimmung der Stereoselektivität der ROL

untersuchten Substrate. ____________________________________________________23

Abbildung 1.9: Einige Beispiele für den Einsatz von Rhizopus sp. Lipasen in der organischen Synthese. _26

Abbildung 1.10: Variation geschützter Peptide, die mit ROL (Amano N) gespalten wurden.____________28

Abbildung 1.11: Schematischer Ablauf einer IMAC Reinigung mit "Chelating Sepharose" von Pharmacia. 35

Abbildung 1.12: Bindung des Thioredoxin an ThioBond™ Material (Invitrogen).____________________37

Abbildung 2.1: Expressionsvektor pCYTEXP1 mit dem ROL-Gen.______________________________42

Abbildung 2.2: Schaukelvektoren für Pichia pastoris und E. coli zur Expression von heterologen Proteinen

in Pichia pastoris.________________________________________________________43

Abbildung 2.3: Relative Lipaseaktivität einzelner Pichia pastoris GS115 Klone transformiert mit

pPICZαA_ROL. ________________________________________________________ 45

Abbildung 2.4: Relative Lipaseaktivität einzelner Pichia pastoris Klone transformiert mit

pGAPZαA_ROL. ________________________________________________________47

Abbildung 2.5: Fermentation 1 in komplexem Medium mit Methanolzugabe nach jeweils 24 h. _______52

Abbildung 2.6: Fermentation 2 in komplexem Medium mit Methanolzugabe gekoppelt an CO

-Gehalt im

Abgas. _________________________________________________________________52

Abbildung 2.7: Fermentation 3 in komplexem Medium mit Methanolzugabe gekoppelt an DO-Gehalt im

Fermenter-Überstand. _____________________________________________________53

Abbildung 2.8: Vergleich der Flußrate der Luft, des DO-Gehalt und des Methanol-Gehalts bei

Fermentation 4.__________________________________________________________55

Abbildung 2.9: Fermentation 4 in synthetischem Medium mit der berechneten Fütterungsstrategie nach

Invitrogen ohne Methanolkontrolle. __________________________________________56

Abbildung 2.10: Kallibriergerade für die Bestimmung des Methanolgehalts in synthetischem Basalsalz

Medium. _______________________________________________________________58

Abbildung 2.11: Fermentation 5 in synthetischem Medium mit Methanol Kontrolle durch GC. _________59

Abbildung 2.12: Vergleich der Fütterungsrate zwischen Fermentation 4, 5 und 6. ____________________60

Abbildung 2.13: Fermentation 6 in synthetischem Medium mit Glycerin-Methanol Mischfütterung zu

Beginn der Fermentation. __________________________________________________61

Abbildung 2.14: Vergleich der Arbeitsschritte bei der Kultivierung von ROL in P. pastoris und E. coli.__64

Abbildung 2.15: Elutionsprofil der Reinigung von ROL aus Pichia pastoris nach Kultivierung in komplexem

Medium. _______________________________________________________________65

1 2 ... 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 ... 152 153

Sem comentários

Bosch PPS8 C2 Series Manual do Utilizador Página 10